ارزیابی روش تشخیصی Real Time PCR مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی‌سیلین

نویسندگان

  • حیدری, نرگس - گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران
  • طهماسبی, حامد گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی زاهدان، زاهدان، ایران
  • عزیزی جلیلیان, فرید - گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران
  • علیخانی, محمد یوسف - گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران
چکیده مقاله:

هدف: تشخیص سریع وبه موقع استافیلوکوک اورئوس می‌تواند نقش قابل توجهی در درمان عفونت‌های استافیلوکوکی داشته باشد. با طراحی روش‌های دقیق که دارای حساسیت و اختصاصیت قابل قبولی هستند، می‌توان شناسایی گونه و حتی سویه‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک را انجام داد. هدف از این مطالعه ارزیابی روش تشخیصی Real Time PCR مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی‌سیلین می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی از ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک ذخیره شده در بانک میکروب‌شناسی دانشگاه علوم پزشکی همدان استفاده شد. طراحی پرایمر با انتخاب سایت‌های هدف و ژن ITS برای استافیلوکوک اورئوس و ژن mecA برای سویه‌های مقاوم به متی‌سیلین صورت گرفت. جهت تعیین اختصاصیت و حساسیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده از آزمون Real time PCR و روش آنالیز منحنی ذوب DNA سویه‌های مورد مطالعه استفاده شد. یافته‌ها: اختصاصیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده با استفاده از آنالیز منحنی ذوب DNA جهت شناسایی استافیلوکوک اورئوس در 79/83 درجه سانتی‌گراد و استافیلوکک اورئوس مقاوم به متی‌سیلین در 6/76 درجه سانتی‌گراد به‌دست آمد. حساسیت آنالیتیکی پرایمرهای طراحی شده نیز بر اساس نمودارهای حدآستانه و رقت‌های تعیین شده، برای ژن ITS توانایی شناسایی بیش از 15 CFU باکتری و برای ژن mecA توانایی شناسایی بیش از 25 CFU باکتری را نشان داد. نتیجه‌گیری: طراحی پرایمرهای مناسب و به‌کارگیری تکنیک‌های مولکولی حساس، می‌تواند دو عامل تعیین‌کننده در طراحی روش‌های سریع و دقیق جهت شناسایی باکتری‌های مهاجمی مانند استافیلوکوک اورئوس باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ارزیابی روش ذوب DNA مبتنی بر Real-time PCR جهت تشخیص انتروکوک فکالیس و انتروکوک فاسیوم در ایزوله های بالینی

سابقه و هدف: کندی و خطای انسانی در روش های معمول جهت تشخیص دوگونه انتروکوک فکالیس و انتروکوک فاسیوم که جزء مهمترین گونه های بیماریزا در انسان می باشند، وجود روشهای دقیقتر را ضروری کرده است. هدف از این مطالعه طراحی روشی دقیق و سریع با استفاده از تکنیک ذوب DNA با روش Real Time PCR جهت شناسایی و تفکیک این دو گونه از یکدیگر در ایزوله های بالینی می باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی از ایزوله...

متن کامل

تعیین ارزش تشخیصی روش آنالیز منحنی ذوب مبتنی بر Multiplex Real time برای شناسایی گونه های انتروکوکوس

Background and purpose: Enterococci as a group of bacteria infecting raw foods and dairy products can contaminate different food products. The purpose of this study was to isolate strains of enterococci based on the Real time PCR method using melting curve analysis in food samples. Materials and methods: In this experimental study, 510 samples were collected from which 138 different samples ...

متن کامل

آنالیز منحنی ذوب DNA با کیفیت بالا (HRM) به منظور شناسایی استافیلوکوک اورئوس و سویه مقاوم به متی سیلین

Background and purpose: High Resolution Melting curve analysis DNA (HRM) is one of the most sensitive and precise methods for detecting Staphylococcus aureus and resistance to Methicillin. The aim of this study was to analyze the HRM for detection of methicillin-resistant S. aureus strains. Materials and methods: In this experimental study, standard strains of S.aureus ATCC25923 and ATCC 33592...

متن کامل

بررسی ژن توکسین 1 سندرم شوک توکسیک، در نمونه‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی‌سیلین به روش Multiplex PCR

زمینه و هدف: توکسین‌های تولیدشده به‌وسیله باکتری‌ها، یکی از شایع‌ترین مواردی است که می‌تواند در کنار سایر عوامل بیماری‌زای باکتریایی، باعث بروز یا تشدید بیماری شود. ازجمله بیماری‌های ایجادشده توسط توکسین‌های باکتریایی می‌توان به سندرم شوک توکسیک اشاره کرد. عامل تولید این توکسین ژن tst بوده که می‌تواند بین سویه‌های مختلف استافیلوکوک اورئوس به‌راحتی منتقل شود. در این مطالعه ژن توکسین 1 سندرم شوک ...

متن کامل

تشخیص سریع ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV) با استفاده از روش Real-time PCR مبتنی بر ژن اختصاصی UL27

سابقه و هدف: ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV)، از مهمترین عوامل بیماری زا از نظر اقتصادی در صنعت طیور است. ماکیان تنها مخزن اصلی این ویروس به شمار می آیند. در حال حاضر برای تشخیص این ویروس روش سریع، حساس و دقیقی وجود ندارد. این مطالعه با هدف ارزیابی و معرفی یک روش دقیق مولکولی با استفاده از تکنیک Real-time PCR و مبتنی بر ژن اختصاصی UL27 ویروس ILT، به منظور تشخیص سریع...

متن کامل

تشخیص سریع ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV) با استفاده از روش Real-time PCR مبتنی بر ژن اختصاصی UL27

سابقه و هدف: ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV)، از مهمترین عوامل بیماری زا از نظر اقتصادی در صنعت طیور است. ماکیان تنها مخزن اصلی این ویروس به شمار می آیند. در حال حاضر برای تشخیص این ویروس روش سریع، حساس و دقیقی وجود ندارد. این مطالعه با هدف ارزیابی و معرفی یک روش دقیق مولکولی با استفاده از تکنیک Real-time PCR و مبتنی بر ژن اختصاصی UL27 ویروس ILT، به منظور تشخیص سریع...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 19  شماره 4

صفحات  877- 886

تاریخ انتشار 2017-10

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023